Factor IIG20210A (RT-PCR)

Incidența ei este de aproximativ 6% în populația generală și se află pe locul doi după FV Leiden ca și importanță și frecvență pentru riscul de tromboză. De asemenea această mutație este corelată cu complicațiile obstetricale.

Condiţii de recoltare:

Recoltarea se realizează dimineața în condiții de a jeun, prin puncție venoasă, în tuburi cu anticoagulant EDTA (tuburi cu dop mov). Probele pot fi păstrate la frigider 72 ore timp în care pot fi prelucrate (extragere ADN). Pentru o păstrare mai îndelungată probele necesită congelare la - 70 ˚C. ADN-ul extras poate fi folosit pentru testarea genetică timp de 30 zile dacă este păstrat la congelator la - 20 ˚C sau timp îndelungat dacă este păstrat la - 70 ˚C.

Metoda de determinare:

Din sângele venos recoltat pe anticoagulant se realizează extracția ADN-ului care apoi este marcat prin primeri specifici în zona de interes și apoi amplificat. Prezența mutației căutate este depistată în timp real prin detecția fluorescenței emise de produsul de amplificare (RT - PCR - Real Time Polimerase chain reaction). Tehnica este realizată pe un thermocycler Applied Biosystem ABI 7300 și folosește reactivi Nanogen Advanced Diagnostics.

Interferenţe ale testului:

Probele hemolizate, lipemice, leucopenia (număr mic de leucocite) sau tratamentele cu heparină și heparine cu greutate moleculară mică (Clexane, Innohep, Fragmin) influențează testarea.

Interpretarea rezultatelor:

Mutația G20210A nu este prezentă în mod normal în gena factorului II (rezultat negativ). Rezultatul este pozitiv în condițiile în care mutația căutată este identificată în genă factorului II și poate fi în formă heterozigotă (o genă normală și o genă cu mutație) sau homozigotă (ambele gene cu mutație).